LatifahI iniciou a sua carreira como rapper em 1989, lançando o seu primeiro álbum, All Hail the Queen. Ela fez a sua estreia no cinema com o filme Jungle Fever (1991), e teve seu primeiro papel principal no filme Set It Off, de 1996. Desde então, ela participou em vários filmes como, O Colecionador de Ossos (1999), A Casa Caiu e Scary Movie 3 - Outro Susto de Filme (2003), Taxi (2004), Beauty Shop (2005), As Férias da Minha Vida (2006), Hairspray (2007), Mad Money, Jogo de Amor em Las Vegas e A Vida Secreta das Abelhas (2008), Jogada Certa e Idas e Vindas do Amor (2010), Joyful Noise e Steel Magnolias (2012), Bessie (2015), Milagres do Paraíso (2016) e Girls Trip (2017), além de dobrar a personagem Ellie, nos filmes da franquia A Era do Gelo.
Na televisão, teve o seu primeiro papel de destaque em 1993, como Khadijah James na sitcom Living Single. Também apresentou seu próprio talk show The Queen Latifah Show, que foi exibido de 1999 a 2001, e novamente de 2013 a 2015. Desde 2021, ela atua como Robyn McCall na série da CBS The Equalizer.
